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              猪瘟病毒抗体检测试剂盒原理及使用注意事项

              日期:2018-11-08浏览:145次

                 猪瘟病毒抗体检测试剂盒由预包被口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC重组蛋白的的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成,应用酶联免疫法(ELISA)原理检测猪血清、血浆样本中猪口蹄疫病毒3ABC抗体。实验时在酶标板中加入对照血清和待检样本,经温育后若样品中含有猪口蹄疫病毒3ABC抗体,则将与酶标板上抗原结合,经洗涤除去未结合的其他成分后。

                再加入酶标记物,与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶标记物,在孔中加TMB底物液,与酶反应形成蓝色产物,显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关;加入终止液终止反应后,产物变为黄色;用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值,即可知样品是否含有猪口蹄疫病毒3ABC抗体。

               
                猪瘟病毒抗体检测试剂盒注意事项
               
                1、本试剂盒仅适用于对猪血清或血浆中猪瘟病毒抗体的检测,不能用于其他畜类样品的检测。所有样品、洗弃液和各种废弃物都应按传染物处理。
               
                2、试剂开封后如未用完,板条应和干燥剂一起放入自封袋内密封2-8℃保存,一周内使用,其它液体组份使用后瓶盖应拧紧置2-8℃保存,一周内使用。
               
                3、试剂盒保存于2-8℃,使用前整套试剂应平衡至室温。
               
                4、注意控制反应时间,温育30分钟应控制在30±2分钟内,温育10分钟应控制在10±1分钟内,避免因反应时间缩短或延长而造成整体显色降低或升高。
               
                5、检测时必须设置空白对照(只加显色剂和终止液,不加酶标结合物),并在结果分析时,单波长测定应扣除空白值,双波长测定不应扣除空白值。
               
                6、试剂过期不得使用,不同批号的试剂盒中的组份不得混用,封板膜不得重复使用,试剂瓶盖切勿交叉使用。
               
                7、对标本要求:标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。如果不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融;其次不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

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